煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP +）是細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的兩種重要的輔因子。 NADH是NAD +的還原形式，NAD +是NADH的氧化形式。 NAD形成NADP，通過(guò)酯鍵將磷酸基團(tuán)添加到腺苷核苷酸的2'位置。 NADP用于合成代謝生物反應(yīng)，例如脂肪酸和核酸合成，其需要NADPH作為還原劑。 在葉綠體中，NADP是在光合作用的初步反應(yīng)中重要的氧化劑。 通過(guò)光合作用產(chǎn)生的NADPH用作卡爾文光合作用循環(huán)中生物合成反應(yīng)的還原能力。

傳統(tǒng)的NAD / NADH和NADP / NADPH測(cè)定通過(guò)監(jiān)測(cè)340nm處NADH或NADPH吸收的變化來(lái)進(jìn)行。 Amplite?熒光總NAD和NADH檢測(cè)試劑盒為敏感檢測(cè)NAD和NADH提供了一種便捷的方法。 系統(tǒng)中的酶特異性識(shí)別酶循環(huán)反應(yīng)中的NAD / NADH，其顯著提高了檢測(cè)靈敏度。 此外，該測(cè)定具有非常低的背景，因?yàn)槠湓诩t色可見(jiàn)范圍內(nèi)運(yùn)行，這顯著降低了生物樣品引起的干擾。

概述

準(zhǔn)備N(xiāo)AD / NADH反應(yīng)混合物（50μL）

添加NADH標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品（50μL）

在室溫下孵育15分鐘--2小時(shí)

監(jiān)測(cè)Ex / Em = 540 / 590nm處的熒光強(qiáng)度