內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)是真核生物細(xì)胞中的一種細(xì)胞器,其形成扁平的,膜封閉的囊或稱為池狀的管狀結(jié)構(gòu)的互連網(wǎng)絡(luò)。 ER的膜與外核膜連續(xù)。 ER在大多數(shù)類型的真核細(xì)胞中發(fā)生,但在紅細(xì)胞和精子中不存在。 Cell Navigator 活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)染色試劑盒使用我們的ER Tracer Green作為ER標(biāo)記物。 ER Tracer 綠色染色是一種細(xì)胞滲透性熒光染料,對ER具有高度選擇性。 該染色劑由綠色熒光染料和ER粘合劑組成,其在大多數(shù)細(xì)胞類型中選擇性地結(jié)合ER。 對于某些細(xì)胞,ER Tracer Green可能無法選擇性地與ER結(jié)合。 ER Tracer Green具有與FITC基本相同的光譜特性,使該試劑盒便于使用FITC濾光片組。
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
F0102 | Cell Navigator 活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒 綠色熒光 | 100 Tests | 3840RMB |
溶液配制
1.儲備溶液配制
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
ER Green 原液(500X):
將20μLDMSO(組分C)加入到ER Green (組分A)的小瓶中并充分混合以制備500X ER Green 儲備溶液。 注意:20μL的500X ER Green 原液足以容納一個(gè)96孔板。 如果管子密封,未使用的500X ER Green 儲備溶液可以在≤-20oC下儲存兩周。 避光。
2.工作溶液配制
將20μL500XER Green 儲備溶液加入10 mL活細(xì)胞染色緩沖液(組分B)中,充分混合,制成ER Green 工作溶液。 該ER Green 工作溶液在室溫下穩(wěn)定至少2小時(shí)。 避光。有關(guān)細(xì)胞樣品制備的指南,請點(diǎn)擊查看。
操作步驟
1.在細(xì)胞板中加入100μL/孔(96孔板)或50μL/孔(384孔板)的ER Green TM工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育細(xì)胞15-30分鐘,避光。 注意:ER探針的最佳濃度根據(jù)具體應(yīng)用而有所不同。 濃度高于工作溶液可能對細(xì)胞有毒。 可以根據(jù)特定細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對探針的滲透性來修改染色條件。
2.在每個(gè)孔中移除ER Green 工作溶液。 用物理相關(guān)緩沖液洗滌細(xì)胞三次。
3.染色后修復(fù)細(xì)胞(可選)。 用4%甲醛固定細(xì)胞5-10分鐘。 用物理相關(guān)緩沖液洗滌細(xì)胞三次。
4.使用具有FITC濾光片組(Ex / Em = 490 / 520nm)的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光信號。