Cell Meter 比色法細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒是用于細(xì)胞毒性檢測(cè)的試劑盒，Cell Meter比色法細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 使用可溶于水的四唑染料。在電子載體（PMS）存在的細(xì)胞還原性條件下，該染料能產(chǎn)生水溶性的甲瓚。四唑鹽經(jīng)細(xì)胞脫氫酶變成橙色的甲瓚產(chǎn)物，它在培養(yǎng)基是可溶的。一定數(shù)目甲瓚產(chǎn)物與一定數(shù)目活細(xì)胞成比例。我們的試劑盒比其他基于四唑細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒（如MTT、XTT）提供更強(qiáng)有力操作方案。不需要預(yù)混合，我們?cè)噭┖兴倪螓}染料直接加入細(xì)胞。此外，我們的試劑盒比其他四唑細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒（如MTT、XTT）具有更高的靈敏度。能廣泛的使用多種設(shè)備平臺(tái)。適應(yīng)于多種的研究，例如細(xì)胞粘附、細(xì)胞趨化、多耐藥性、細(xì)胞生存能力、凋亡和細(xì)胞毒性等。該試劑盒具備最佳的組分和實(shí)驗(yàn)操作流程，適合于增殖或者不增殖的細(xì)胞，并能用于懸浮細(xì)胞或者貼壁細(xì)胞。

操作步驟

1.在具有黑色壁和透明底部的組織培養(yǎng)微孔板中每孔100至10,000個(gè)細(xì)胞。 將測(cè)試化合物添加到細(xì)胞中，并在37℃，5％CO 2培養(yǎng)箱中孵育所需的一段時(shí)間（例如24,48或96小時(shí)）。 對(duì)于空白孔（沒(méi)有細(xì)胞的培養(yǎng)基），加入相應(yīng)量的化合物緩沖液。 對(duì)于96孔板，建議的總體積為100μL，對(duì)于384孔板，建議的總體積為50μL。

2.對(duì)照設(shè)置
2.1陽(yáng)性對(duì)照：含有細(xì)胞和已知的增殖或細(xì)胞毒性誘導(dǎo)劑。

2.2陰性對(duì)照：含有細(xì)胞但不含有測(cè)試化合物。

2.3載體對(duì)照：含有細(xì)胞和用于遞送測(cè)試化合物的載體。

2.4非細(xì)胞對(duì)照：含有不含細(xì)胞的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

2.5測(cè)試化合物對(duì)照：含有用于遞送測(cè)試化合物[Hank's平衡鹽溶液（HBSS）或磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）]和測(cè)試化合物的載體對(duì)照。 一些測(cè)試化合物具有強(qiáng)自發(fā)熒光并且可能產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。 注意：對(duì)于96孔板，將所有對(duì)照的總體積與100μL匹配，對(duì)于具有生長(zhǎng)培養(yǎng)基的384孔板，將所有對(duì)照的總體積與50μL相匹配。

3.將測(cè)定溶液（組分A）預(yù)熱至37°C。 在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前徹底混合。

4.向每個(gè)孔中加入20μL（96孔板）或10μL（384孔板）的測(cè)定溶液（組分A）。 輕輕搖動(dòng)平板30秒，混合試劑。

5.將細(xì)胞在37°C，5％CO₂培養(yǎng)箱中孵育1-24小時(shí)，避光。 注意：適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于單個(gè)細(xì)胞類型的代謝率和使用的細(xì)胞濃度。 優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。 不推薦極長(zhǎng)的孵育時(shí)間，因?yàn)橹甘緞┛梢赞D(zhuǎn)化為無(wú)色化合物。

6.用吸光度讀板儀在OD比率A570nm / A605nm下監(jiān)測(cè)吸光度的增加。 OD₅₇₀與OD₆₀₅的比率用于確定每個(gè)孔中的細(xì)胞活力。 注意：細(xì)胞存活率與OD₅₇₀增加和OD₆₀₅減少成正比。