CytoTell 活細(xì)胞染色紅色590是用于活細(xì)胞染色的探針，流式細(xì)胞儀結(jié)合熒光染色是一個強(qiáng)大的分析異質(zhì)細(xì)胞群工具。在所有現(xiàn)有的熒光染料CFSE是一種廣泛用于活細(xì)胞分析的優(yōu)選細(xì)胞增殖的指標(biāo)。然而，這是不可能用CFSE及其熒光素類似物的GFP轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，或為其中一個FITC標(biāo)記的抗體用于自CFSE及其熒光素類似物，具有的激發(fā)和發(fā)射光譜幾乎相同。 CytoTell 染料是主要的激光線，如405納米， 488納米或633納米多色排放。 CytoTell 染料具有最小的細(xì)胞毒性，并且是用于多色應(yīng)用與任何GFP的細(xì)胞系或FITC-標(biāo)記的抗體，它們激發(fā)或發(fā)射光譜的熒光明顯不同。 CytoTell 紅色是紅色熒光染料染色的細(xì)胞均勻。 CytoTell 紅也可用于標(biāo)記細(xì)胞的長期跟蹤。分析使用兩個參數(shù)的曲線可以更好的提供分辨率。細(xì)胞標(biāo)記的細(xì)胞CytoTell 紅可以是固定和透化的，適用于使用標(biāo)準(zhǔn)含甲醛固定劑與基于皂苷的透化緩沖液胞內(nèi)靶標(biāo)分析。 CytoTell 紅色為630nm的激發(fā)峰，并且可以通過紅色（ 633納米）的激光線激發(fā)。它具有660nm的峰值發(fā)射，可以用一個660/20通道濾波器（相當(dāng)于APC的Alexa Fluor ? 647 ，和Cy5 ? ） ，使其與利用GFP或FITC標(biāo)記的抗體的多色細(xì)胞分析中的應(yīng)用兼容被檢測。

Cell Meter檢測試劑盒是一類用于檢測細(xì)胞功能的系列工具，包括細(xì)胞活性、細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞膜電位以及細(xì)胞周期等方面的指標(biāo)。每種檢測方案均能提供不同熒光顏色的檢測方案。這些高效的檢測方案為從多角度研究細(xì)胞功能活動提供了一種十分有效的方法。Cell Meter細(xì)胞活性檢測試劑盒 綠色熒光 使用一種專屬型染料，一旦進(jìn)入活細(xì)胞中，其熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。這種染料是一種疏水性復(fù)合物，可以輕易地進(jìn)入完整的活細(xì)胞。通過細(xì)胞內(nèi)酯酶水解弱熒光性底物，產(chǎn)生具有強(qiáng)烈熒光的親水性產(chǎn)物，并且可以在保持在細(xì)胞質(zhì)中。這種酯酶的活性與活細(xì)胞數(shù)量成比例關(guān)系，因此酯酶水解熒光底物形成的產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度與活細(xì)胞數(shù)量相關(guān)。生長在培養(yǎng)板中的細(xì)胞可以被染料，且在不到兩小時內(nèi)就可以完成定量分析。本檢測法比四唑鹽或者基于Alarmar Blue的檢測更加強(qiáng)大、穩(wěn)定。它可以用于許多熒光實驗平臺的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它在許多研究中非常有用，包括細(xì)胞粘附性、趨化作用、藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性研究。本試劑盒提供所有必需組分和最佳檢測方案。它適合于增殖型和非增殖型細(xì)胞，也可用于懸浮和貼壁細(xì)胞。96微孔板中，每孔用試劑100ul，本試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行500次檢測；384微孔板中，每孔加試劑25ul，本試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行2000次檢測。

1工作溶液配制

將全部內(nèi)容物（20μL）的CytoCalcein green，AM儲備溶液加入10mL測定緩沖液（組分C）中，并充分混合以制備CytoCalcein green，AM工作溶液。 這種CytoCalcein green，AM工作溶液在室溫下穩(wěn)定至少2小時。 注意：如果CHO細(xì)胞等細(xì)胞含有促進(jìn)熒光染料隨時間泄漏的有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運蛋白，應(yīng)制備丙磺舒儲備溶液，并加入到加樣緩沖液中，最終孔內(nèi)工作濃度范圍為1到2.5 mM。 將未使用的丙磺舒儲備溶液等分并儲存在≤-20℃。

2操作步驟

1.根據(jù)需要用測試化合物處理細(xì)胞。注意：在添加化合物之前不必洗滌細(xì)胞。然而，如果測試的化合物對血清敏感，則可在添加化合物之前吸出生長培養(yǎng)基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔（96孔板）和25μL/孔（384孔板）的1X Hank鹽溶液和20mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的緩沖液?；蛘撸?xì)胞可以在無血清培養(yǎng)基中生長。

2.添加100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein green，AM工作溶液。

3.將板在室溫或37°C孵育1小時，避光。 （孵育時間可以從15分鐘到過夜。我們得到了最佳結(jié)果，孵育時間少于4小時）。注意：適當(dāng)?shù)姆跤龝r間取決于所使用的單個細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。注意：裝載后請勿清洗電池。注意：對于非粘附細(xì)胞，建議在孵育后以800 rpm的速度離心細(xì)胞板2分鐘。

4.用Ex / Em = 490 / 525nm的熒光板讀數(shù)器監(jiān)測熒光強(qiáng)度。