SunRed 醋酸 細(xì)胞活性檢測是用于細(xì)胞活性檢測的試劑盒。酯酶可催化水解SunRed 乙酸鹽(SRA)產(chǎn)生Sun Red熒光基團(tuán)，該熒光基團(tuán)在633nm處可以被激發(fā)，發(fā)射光波長在~660nm處。Sun Red熒光基團(tuán)可以用Cy5濾光片檢測，大多數(shù)商業(yè)熒光儀器中都裝有Cy5濾光片。盡管Sun Red在633nm處被激發(fā)，~660nm發(fā)出紅光；但是SRA在633nm處的光吸收很小，在沒有紅光發(fā)射的條件下，這使SRA成為最靈敏的NIR（近紅外）酯酶底物之一。在流行的熒光色彩應(yīng)用于其它細(xì)胞功能分析時(shí)，SRA提供另一種顏色用于可行性細(xì)胞的分析。SRA是一個(gè)非熒光性的疏水性化合物，它可以通過細(xì)胞膜，在細(xì)胞內(nèi)酯酶水解乙酸鹽基團(tuán)作用下，產(chǎn)生高強(qiáng)度熒光的產(chǎn)物Sun Red。Sun Red分子在完整細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞內(nèi)積累至產(chǎn)生足夠深的紅色熒光，因此可以用作細(xì)胞的標(biāo)簽。細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)不完整或者代謝活性弱的細(xì)胞，不能夠積累熒光產(chǎn)物，因此不顯現(xiàn)深色的紅色熒光。SRA可以與綠色熒光染料試劑（例如FITC或者Alexa Fluor 488標(biāo)記的抗體）結(jié)合使用。
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
C0704 | SunRed 醋酸 細(xì)胞活性檢測 | 25 mg | 1236RMB |
溶液制備
1.儲(chǔ)備溶液
所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 SunRed 醋酸鹽原液（2至10 mM）
準(zhǔn)備2至10 mM的SunRed 醋酸鹽在DMSO中的儲(chǔ)備溶液。 應(yīng)立即使用原液。
2.工作溶液
SunRed 醋酸鹽工作溶液：
在實(shí)驗(yàn)前，在含有20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的緩沖液的1X Hank鹽溶液中，以5至10μM制備SunRed 醋酸鹽工作溶液。
樣品分析
1.從細(xì)胞中取出培養(yǎng)基。
2.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的SunRed 乙酸鹽工作溶液。
3.將SunRed 醋酸鹽工作溶液板在室溫或37°C下孵育1小時(shí)，避光。 適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所用的單個(gè)細(xì)胞類型和細(xì)胞濃度。 優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。 對于非粘附細(xì)胞，建議在孵育后以800rpm離心細(xì)胞板2分鐘。
4.監(jiān)測Ex / Em = 620 / 660nm處的熒光強(qiáng)度（截止640nm）。
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